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分离培养细菌、真菌、螺旋体等可选择适当的人工培养基,分离培养病毒可选用禽胚、动物或细胞组织等。
分得病原体后,再进行形态学、培养特性、动物接种(致病性)、免疫学及分子生物学等鉴定。
(4)动物接种试验:
有时人工培养分离到的微生物不一定是引起发病的病原体,因此需要选择对病原体最敏感的动物进行人工感染试验。
将病料用适当的方法处理并进行人工接种,然后根据对动物的致病力、症状和病理变化特点来帮助诊断。
当实验动物死亡或经一定时间剖杀后,观察体内变化,并采取病料进行涂片检查和分离鉴定。
一般常用的实验动物有家兔、小鼠、豚鼠、仓鼠、家禽、鸽子等,当实验动物对病原体无感受性时,可以采用有易感性的本种动物进行试验,但对于大、中型动物或特种动物因费用高,而且需要严格的隔离条件和消毒设施,因此只有在必要和条件许可时才进行本种动物接种试验。
从病料中分离出病原微生物,虽是确诊的重要依据,但也应注意动物的“健康带菌(毒)”
现象,其结果还需与临床及流行病学、病理变化结合起来进行综合分析。
有时即使没有发现病原体,也不能完全否定该种传染病的诊断,因为任何病原学方法都存在有漏检的可能。
3.免疫学诊断
免疫学诊断是传染病诊断和检疫中最常用、最重要的诊断方法之一,它包括血清学试验和变态反应两大类方法。
(1)血清学试验:
可以用已知抗原来测定被检动物血清中的特异性抗体,也可以用已知的抗体(免疫血清)来测定被检材料中的抗原。
免疫学方法检测的抗原可以是完整的病原体,也可以是病原体的一部分。
根据实验原理,血清学试验可分为中和试验(毒素中和试验、病毒中和试验等)、凝集试验(直接凝集试验,间接凝集试验,间接血凝试验、协同凝集试验和血细胞凝集抑制试验)、沉淀试验(环状沉淀试验、琼脂扩散沉淀试验和免疫电泳等)、溶细胞试验(溶菌实验、溶血试验)、补体结合试验以及免疫荧光技术、免疫酶技术,放射免疫测定、单克隆抗体技术等。
近年来,因其与现代科学技术相结合(如蛋白感芯片、多肤芯片等),血清学试验发展很快,在方法改进上日新月异,应用也越来越广,已成为传染病快速诊断的重要工具。
(2)变态反应:
动物患某些传染病(主要是慢性传染病)后,可对该病病原体或其产物(某种抗原物质)的再次进入产生强烈反应,即变态反应。
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